細胞電気生理学入門

アフリカツメガエル卵母細胞を使った発現系

• 一般的知識
• この実験系の応用範囲

• アフリカツメガエルの飼育
• アフリカツメガエルの飼育法
• アフリカツメガエル飼育方法改良の経緯

• RNA合成
• プラスミドからRNA合成まで

• 卵母細胞の扱いとRNA微量注入法
• 卵母細胞の単離·培養の下準備
• 卵母細胞の単離手順
• RNA注入用ピペットの加工
• RNAの微量注入法

• 電気生理学的測定法
• 二電極膜電位固定法−Warner OC-725Cの場合
• 電極の作り方
• 細胞内への薬液適用法
• Cut-Open 法（1998.2 日薬理誌・実験技術）
• トラブルシューティングの事例

動物細胞パッチクランプ法

• 一般的知識
• さまざまな測定モード

• 動物細胞の培養
• 細胞種の選択
• 培養と継代

• 発現ベクター作成とトランスフェクション
• 発現ベクターへのサブクローニングのコツ
• 遺伝子導入

• パッチクランプ測定法
• Whole-Cell 膜電流測定
• 記録液と電極液

• Native 細胞からの記録
• 単離ニューロンからの記録
• 海馬スライスパッチクランプ
• 脊髄スライスパッチクランプ

電気生理セットアップ編

設置場所

• 周囲の環境（振動，電源，アース，空調）
• 防振台
• シールドボックスとノイズ落とし

増幅器系
• 接続ケーブルの作り方（ハンダづけの基本）

信号処理系
• A/D変換の基礎
• データ解析装置（コンピュータ）
• ペンレコーダと保存メディア

光学系
• 顕微鏡と照明装置電源の工夫

微動操作系
• 電極マニピュレータ（微動装置）

電極作成機器
• 電極製作器とマイクロフォージャ（先端加工器）

• 記録チャンバー·灌流系
• 灌流チャンバー，排水装置
• 溶液灌流および切り換え装置

• 小物類
• 銀塩化銀と塩橋
• 「あったら便利」電気生理にお奨めの小物グッズ